1. Ajouter des échantillons : ajouter la dilution de l'échantillon à la plaque enduite, diluer le sérum dans du PBS ou une solution saline à 1:20, puis ajouter 10 ul dans les puits de réaction de la microplaque.

2. Ajout de contrôle : contrôle négatif 3 puits, contrôle positif 1 puits et sérum de contrôle 100 ul.

3. Incubation : Agiter la plaque de réaction pour bien mélanger l'échantillon puis le placer dans un incubateur à 37°C ou un bain-marie pendant 20 minutes.

4. Lavage des sols : Diluer 15 ml de solution de lavage à 300 ml avec de l'eau distillée. Lors du lavage à la main, le contenu de l'air de la plaque de réaction doit être versé et placé dans le trou rempli de liquide de lavage, puis se tenir debout 30 pour secouer violemment. Répétez cette opération 5 fois et battez-le à sec. La machine doit effectuer 5 fois. 200 ul de solution de lavage peuvent être injectés dans chaque puits ou remplis, puis laissés pendant 30 minutes et éponger.

5. Ajouter une solution de travail marquée par une enzyme : ajouter 100 ul de solution de travail marquée par une enzyme dans chaque puits d'un incubateur à 37 °C et laver la plaque cinq fois après 20 minutes. La plaque de lavage est la même qu'à l'étape 4.

6. Il s'agit de la dernière étape de la réaction, avec développement de la couleur et arrêt de la réaction : 50 ul du substrat sont ajoutés au puits de réaction et la couleur est développée pendant 10 minutes dans l'obscurité à 37 °C. La solution dans chaque puits a été arrêtée et mélangé pour terminer la réaction. L'utilisation des microplaques doit être réalisée dans des conditions stériles. Désinfectez et nettoyez soigneusement les plaques après utilisation, mais notez que certaines plaques nécessitent de lire attentivement les instructions pour voir si elles peuvent être stérilisées à haute température.