1. Lors de la détermination de l'endotoxine dans le sang, faites attention à la sélection des méthodes et des réactifs.

2. Préparation de plasma ou de sérum

En tant qu'échantillon clinique commun, le plasma est l'échantillon principal et son taux d'utilisation est supérieur à 95 %. Par conséquent, il est très important de préparer le plasma en tant que partie principale du liquide corporel. Selon Das, l'endotoxine est généralement attachée aux plaquettes en plus de son état libre, il est donc plus approprié d'utiliser du plasma contenant un grand nombre de plaquettes comme échantillon. Lors de la préparation de plasma humain ou de plasma animal, à l'heure actuelle, afin de prévenir les dommages cellulaires, les pays étrangers utilisent principalement la séparation à basse température, en utilisant des échantillons de plasma contenant un grand nombre de plaquettes, c'est-à-dire dans des conditions de séparation de 4 ℃ 1000gx10 minutes, ou 3000gx40 secondes conditions de séparation lorsqu'il n'y a pas de centrifugeuse à basse température. Il n'est pas permis d'effectuer une séparation à grande vitesse et à long terme à des températures normales. De plus, lors de la séparation du plasma ou du sérum, la contamination bactérienne doit être évitée.

Préparation du sérum : utiliser une seringue sans anticoagulant pour prélever le sang et le transférer dans un tube à centrifuger, et le placer dans un bain d'eau glacée pendant 30 minutes, à 4°C, 1000xg, 10 minutes pour la centrifugation.

Après séparation du plasma ou du sérum, s'il n'est pas utilisé temporairement, il peut être congelé à - 80 ℃ et utilisé dans un délai de 1 mois. Remarque Afin d'éviter l'adsorption d'endotoxines, veuillez utiliser un tube à essai en verre pour le stockage.

3. Types et effets des anticoagulants

Lors de la préparation du plasma, en raison de l'ajout de certains anticoagulants, le type et la quantité d'anticoagulants ont un impact important sur le taux de récupération. Généralement, les anticoagulants couramment utilisés comprennent principalement l'héparine, le citrate de sodium et l'EDTA, parmi lesquels l'héparine est la plus utilisée. Cependant, nous savons qu'une grande quantité d'héparine va interférer avec la réaction de l'endotoxine, en particulier pour la méthode de chauffage par dilution et la méthode d'extraction au chloroforme, ce qui réduira le taux de récupération, mais aura moins d'impact sur la méthode PCA, donc la quantité d'héparine ajoutée et libéré pendant la préparation du plasma n'a besoin que de 2 à 5 μ L/ml suffisent.